Вестерн-блот - виявляє хворобу Лайма і не тільки
Вестерн-блот - це лабораторний тест, який дозволяє ідентифікувати специфічні білки в біологічних зразках. Цей метод має багато застосувань, і одним з найпоширеніших є виявлення антитіл, специфічних до певних антигенів бактерій, вірусів і паразитів.
На практиці найчастіше таким чином підтверджують хворобу Лайма, але Вестерн-блот також використовується в діагностиці таких мікробів як:
- вірус ВІЛ,
- вірус герпесу,
- вірус гепатиту С
- туберкульозні палички,
- бактерії хелікобактер пілорі.
Цей вид тесту також використовується для діагностики онкологічних, аутоімунних та генетичних захворювань.
В чому полягає тест Вестерн-блот? Біологічним матеріалом є кров, взята у пацієнта. Крім того, необхідні зразки бактерій або інших мікробів з лаборатоної культури.
На першому етапі ці збудники поміщають у спеціальний гель, а потім обробляють електричним струмом, щоб вони розщепилися на первинні елементи. Таким чином виділяються антигенні білки, які потім наносяться на спеціальну нітроцелюлозну мембрану, розрізану на смужки.
Тут антигени з'єднуються з сироваткою крові, а потім все це забарвлюється. Це дозволяє виявити специфічні антитіла, спрямовані, наприклад, проти спірохети Лайма або іншого мікроба.
Reklama
Як підготуватися до тесту Вестерн-блот?
Для проведення Вестерн-блот-тесту потрібен зразок крові. Чи треба до цього готуватися? Чи треба голодувати? Пацієнт повинен звернутися в конкретну лабораторію. Кожна лабораторія має свої вимоги.
Є лабораторії, які не очікують від пацієнта нічого особливого або якихось жертв. Інші, навпаки, вимагають, щоб пацієнт прийшов на аналіз вранці (між 7 і 10 годинами ранку), голодував (не менше 12 годин без їжі), не рекомендується палити в цей день і навіть жувати жувальну гумку.
Однак, це загальні рекомендації для аналізів крові, Вестерн Блот нічим не відрізняється від інших лабораторних досліджень.
Пацієнтам, які приймають ліки, в тому числі антибіотики, бажано, якщо це можливо, здати зразок крові на аналіз до прийому ранкової дози.
Reklama
Як інтерпретувати Вестерн-блот?
Інтерпретація результатів Вестерн-блоту здається простою, оскільки вони можуть бути позитивними або негативними. Насправді, однак, є багато нюансів, які роблять необхідним довірити аналіз досвідченому лікарю.
По-перше, результати інтерпретуються в залежності від симптомів конкретного захворювання. По-друге, тест може бути хибнопозитивним або негативним, що пов'язано зі специфічністю окремих антитіл.
Дійсно, слід пам'ятати, що перевіряється наступне:
- Антитіла IgM (імуноглобулін М) - виробляються імунною системою у відповідь на інфекцію, що триває; вони з'являються спочатку на ранній стадії інфекції, потім їх кількість поступово зменшується;
- Антитіла IgG (імуноглобуліни G) - виробляються пізніше, зазвичай через кілька тижнів, досягаючи максимальної концентрації через довший період часу, тобто через багато місяців або навіть років.
У випадку тестування методом Вестерн-блот позитивний IgM зазвичай вказує на активну і відносно ранню фазу захворювання. Позитивний IgG, з іншого боку, може вказувати як на активну, так і на хронічну інфекцію, а також на наявність інфекції в анамнезі. Останнє є хибнопозитивним результатом.
Негативний результат свідчить про відсутність інфекції. Але будьте обережні, також можливо отримати хибнонегативний результат. Це трапляється, коли тест проводиться занадто рано.
Так зване серологічне вікно, тобто час, що проходить від початку інфікування до появи перших антитіл, становить від кількох днів до кількох тижнів. Цей час варіюється для різних захворювань.
У випадку хвороби Лайма після укусу кліща має пройти мінімум чотири тижні, а найбільш достовірний результат отримують приблизно через шість тижнів.
Слід мати на увазі, що хибнонегативний результат буде отриманий і в зовсім іншій ситуації, тобто коли весь пул антитіл був радикально використаний для боротьби з хворобою.
Через ризик хибнопозитивних і хибнонегативних результатів рекомендується час від часу повторювати Вестерн-блот-тест. Цілком можливо, що справжній і достовірний результат буде отримано лише на четвертий-п'ятий раз.
Крім того, для інтерпретації важлива кількість смуг. Чим більше смуг, тим більш безсумнівним є діагноз.
Reklama
Вестерн-блот проти ІФА
Вестерн-блот рідко виконується як самостійний тест. При діагностиці хвороби Лайма він використовується для підтвердження та уточнення результатів тесту ІФА, який є скринінговим тестом - якщо пацієнт має позитивний результат цього тесту, його скеровують на Вестерн-блот.
У чому різниця між цими двома тестами? ІФА-тест використовується для виявлення антитіл та антигенів. Він дозволяє ідентифікувати їх наявність та оцінити їх концентрацію. На відміну від якісного тесту Вестерн-блот, він є кількісним.
Завдяки своїй високій чутливості він виявляє навіть невеликі кількості білків. Однак він не дає можливості визначити їхню природу. Хоча концентрація "підозрілих" речовин відома, неможливо з упевненістю сказати, що це за речовини.
Тому вважається, що негативний результат ІФА остаточно відкидає підозру на хворобу Лайма, тоді як позитивний результат вимагає подальшого дослідження. Попередньо припускають, що він може бути результатом контакту пацієнта з відповідним збудником, але також може бути наслідком іншої інфекції. Звідси випливає необхідність перевірки на другому етапі.
ІФА-тест також проводиться зі зразка крові - того самого зразка, який пізніше, можливо, буде використаний для перевірки методом Вестерн-блот.
На додаток до двох вищезгаданих, можна також провести ПЛР-тест. У цьому випадку, однак, матеріалом для аналізу є не кров пацієнта, а кліщ, видалений з його тіла. Звичайно, за умови, що він буде збережений і доставлений в лабораторію. У цьому випадку перевіряється наявність ДНК бактерій, відповідальних за розвиток хвороби Лайма.
Reklama
Вестерн-блот тест - скільки часу чекати на результат?
Як довго чекати на результат Вестерн-блоту? Чи правда, що це може зайняти до декількох тижнів? Якщо так, то це рідкість. У випадку тестування на хворобу Лайма, як правило, результати можна отримати протягом декількох днів.
Точний час очікування слід уточнювати в конкретній лабораторії. Багато що залежить від швидкості роботи даної лабораторії, а також від її завантаженості, тобто кількості зразків, що аналізуються за різних умов.
На практиці важливіше не робити тест занадто рано в серологічному вікні. Отже, хоча багато пацієнтів, яких укусив кліщ, хочуть якомога швидше дізнатися, чи захворіли вони на хворобу Лайма, важливо набратися терпіння і почекати щонайменше чотири тижні, перш ніж ставити діагноз.
Reklama
Де можна зробити Вестерн-блот тест?
Де можна зробити Вестерн-блот тест? Теоретично, в будь-якій лабораторії, що пропонує цей вид діагностики - їх багато, і ви можете дізнатися, що вони пропонують, в інтернеті.
На практиці рекомендується звертатися в установи з хорошою репутацією і з використанням перевірених, рекомендованих, стандартизованих методів. Це важливо для достовірності отриманого результату, а також для його інтерпретації.
Якщо ви бажаєте здати аналізи на підставі направлення, виданого лікарем, необхідно пам'ятати, що вони можуть бути проведені тільки в тій лабораторії, з якою у лікаря або закладу, в якому він працює, є договір, і яка чітко вказана в направленні.
Reklama
Вестерн-блот ціна. Скільки коштує тест?
Ціна Вестерн-блоту, виконаного на платній основі, становить близько 200-300 злотих, залежно від міста, конкретної лабораторії та методу, який використовується. Іноді вартість може бути трохи нижчою, якщо пацієнт платить за повний пакет ІФА плюс Вестерн-блот. Слід нагадати, що ці тести є взаємодоповнюючими і немає сенсу замовляти другий, якщо не виконано першого.
Однак, можна скористатися компенсацією з Національного фонду охорони здоров'я. Тоді Вестерн-блот-тест буде повністю безкоштовним (те ж саме стосується і ІФА-тесту). Обов'язковою умовою є отримання направлення.
Лікар первинної ланки не уповноважений його видавати. Його роль у цьому випадку - лише виписати направлення до інфекціоніста. І вже там пацієнта можуть направити на тест Вестерн-блот.